生物制剂虽然目前亚硝胺杂质污染风险较低，但由于分子多样性和复杂的制造过程，行业需持续警惕。监管机构已制定评估程序以确保安全。高纯度水使用、精准的纯化步骤和低温储存条件有助于降低亚硝胺杂质含量。尽管如此，特定条件下风险可能上升，需进行彻底的风险评估和管理。
生物制剂产品在防止亚硝胺杂质或N-亚硝基二甲胺(NDSRI)污染方面具有坚实的基础，这得益于迄今为止尚未有因亚硝胺杂质相关问题而导致该类产品从市场撤回的案例。
然而，生物治疗药物的分子类型、制造过程和供应链的显著多样性，为亚硝胺杂质的形成提供了新的潜在途径。因此，行业必须保持对这些有害杂质的高度警惕。
图1 亚硝胺杂质种类示意图
当前，对生物制剂中亚硝胺杂质污染的认识主要集中在其形成条件和潜在途径上。尽管生物制剂中亚硝胺杂质的风险较低，但监管机构和行业已经建立了风险评估和测试程序，以确保这些产品的安全性。例如，欧洲药品管理局(EMA)已经将所有药品，包括生物制剂，纳入了亚硝胺杂质风险评估的范围。
大约20%的当前小分子仿制药具有活性胺官能团，在特定条件下可能与亚硝胺杂质反应形成NDSRIs。这些条件包括存在亚硝胺杂质剂（如亚硝胺杂质）、适当的胺或酰胺基团，以及适宜的化学条件，如高温、酸性条件或液态环境。
生物制剂中亚硝胺杂质含量低的原因可以归结于几个关键因素：使用高纯度水、基于分子大小的纯化程序，以及不有利于亚硝胺杂质形成的加工和储存条件。
此外，生物制剂的特殊性质，如高水分含量、通常在低温条件下的加工和储存，以及通常不含有促进亚硝胺杂质形成的化学基团，也在降低亚硝胺杂质含量方面发挥了作用。制造过程中的纯化步骤，如层析和过滤，有助于去除可能的低分子量杂质，包括亚硝胺杂质。
生物制剂的分子结构通常较为复杂，含有多种官能团，这些官能团可能作为亚硝胺杂质形成的清除剂，进一步减少了亚硝胺杂质的生成。
尽管生物制剂中亚硝胺杂质水平低，但制造商仍需对使用已知亚硝胺杂质剂的制造过程进行彻底的风险评估。在特定情况下，如使用合成肽或蛋白质、某些包装材料（例如含有弹性体瓶塞的包装系统）或辅料（如抗氧化剂聚乙烯亚胺）时，亚硝胺杂质的风险可能会增加。
此外，化学合成的组件和中间体可能与药物产品具有相同的亚硝胺杂质杂质潜在风险。因此，尽管目前生物制剂中没有因亚硝胺杂质问题导致的市场撤回，但生物制剂的多样性和制造过程的复杂性要求行业持续关注和应对这一问题。
对于测试生物制剂中亚硝胺杂质含量的检测方式，包括但不限于以下几种方法：
- 气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）：这是一种高效的分离和检测技术，专门用于识别和量化微量的亚硝胺杂质。
- 液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）：这种方法适用于分析复杂样品中的亚硝胺杂质，尤其是在生物制剂这类复杂基质中。
这些检测技术需要经过严格的开发和验证，以确保它们在生物制剂这一复杂基质中的适用性和准确性，从而为生物制剂的安全性提供坚实的科学依据。
